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    膠體金快速檢測卡操作過程中的常見問題

    作者: vch12690211
    發(fā)布于: 2023-08-22 10:59
    閱讀: 325

    膠體金檢測卡又被稱為膠體金檢測試紙,是一種不需要專業(yè)技能和昂貴復(fù)雜的儀器設(shè)備即可實現(xiàn)對抗原、抗體和半抗原等各種分析物的定量和半定量檢測的快速檢測產(chǎn)品。

    膠體金卡的組成:

    膠體金檢測卡由樣品墊、結(jié)合墊、層析膜,吸水紙和塑料卡殼五個單元組成。樣品墊為經(jīng)過處理的纖維膜或者玻璃棉,作用是快速吸收待檢樣品溶液,使其通過虹吸作用向結(jié)合墊側(cè)向流動。結(jié)合墊同樣是纖維膜或者玻璃棉,主要用于吸附有標(biāo)記的生物活性材料(如金標(biāo)抗體),它可與待測樣品溶液中的檢測靶標(biāo)結(jié)合形成肉樣可見的免疫復(fù)合物。層析膜為纖維膜或者尼龍膜,連接在結(jié)合墊和吸水墊之間,其上固定有兩條或者多條不同活性材料,形成“檢測線T線“和”控制線C線“印跡,主要用于與攔截帶標(biāo)記的免疫復(fù)合物,顯示檢測結(jié)果。塑料卡殼是適用于將這些組件包裝起來的外殼,方便檢測同時具有固定卡條。

    膠體金檢測卡的反應(yīng)原理:

    檢測卡是基于膜免疫層析原理建立起來的快速檢測產(chǎn)品。當(dāng)將制備好的待測樣品溶液滴加到檢測卡滴液孔(s孔),樣品溶液在虹吸作用下由測試端向手柄端側(cè)向流動,待測靶標(biāo)在側(cè)向流動過程中會與結(jié)合墊上的生物活性物質(zhì)(抗體、抗原或者生物大分子)先發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),形成復(fù)合物,在側(cè)向流動中在與檢測線和質(zhì)控線上的生物活性物質(zhì)發(fā)生結(jié)合反應(yīng)固定起來,形成肉眼可見的檢測線和質(zhì)控線,進(jìn)而根據(jù)檢測線和質(zhì)控線的顯色情況判斷結(jié)果。 

    下面我們介紹下膠體金快速檢測卡操作過程中的常見問題

    常見問題/異常情況

    原因分析

    建議處理方案

    樣品層析速度異常慢無樣本跑動(在檢測窗內(nèi)不見有液體在膜上流動)

    1. 加樣量太少(一般要求加樣為40-80ul)。
    2. 樣本過于粘稠或有沉淀物(如血塊)。
    3. 該測試條已受潮失效。
    1. 增加加液量或滴加少量輔助液
    2. 滴加少理輔助液,對樣本進(jìn)行預(yù)處理以去除沉淀物(血清/血漿離心后使用,全血重新取樣)
    3. 更換新測試條重新檢測,測試條盡量現(xiàn)拆現(xiàn)用

    檢測窗內(nèi)出現(xiàn)紅/紫色堅線

    該試紙條受輕微的物理損傷

    該情況不影響檢測結(jié)果,可在背景清晰后于規(guī)定時間內(nèi)讀取結(jié)果,或更換新測試條重新檢測

    有大量全血溢出,NC膜表面偏紅,影響結(jié)果判讀

    1. 該測試條NC膜嚴(yán)重受損(機(jī)械損傷)或斷裂
    2. 使用已溶血的全血標(biāo)本
    1. 更換新測試條重新檢測。
    2. 盡量使用新鮮全血進(jìn)行檢測

    層析時無紅/紫紅色背景出現(xiàn)

    該測試條已受潮失效

    更換新測試條重新檢測

    漏檢率偏高(假陰性)

    1. 檢測時間太短
    2. 加樣量太少,輔助液滴加過量,樣本被稀釋
    3. 樣本中被檢物濃度太低
    4. 個別樣本中含有較為特殊物質(zhì)或亞型
    5. 該測試條受潮,活性下降或失活
    1. 按說明書要求正確判讀(建議對于較弱陽性或陰性標(biāo)本至少10-15分鐘判讀結(jié)果
    2. 按說明書要求正確加樣或輔助液
    3. 采用其它檢測方法進(jìn)行確認(rèn)
    4. 更換新測試條重新檢測,測試條盡量現(xiàn)拆現(xiàn)用

    檢測線/對照線不完整

    該試劑條有輕微的物理損傷

    該情況不影響檢測結(jié)果,也可更換新測試條重新檢測

    檢測線與對照線之間出現(xiàn)灰暗的陰影

    測試條NC膜表面的透明膠帶邊沿引起的視覺差異

    該情況不影響檢測結(jié)果,可在規(guī)定時間內(nèi)讀取結(jié)果

    檢測后出現(xiàn)假陽性結(jié)果

    1. 該測試條靈敏度偏高
    2. 該樣本含特殊干擾物或已被污染
    3. 在規(guī)定的時間后判讀結(jié)果
    1. 提前判讀結(jié)果或更換新測試 條重新檢測
    2. 用其他檢測方法確診檢測結(jié)果,確保樣本不受污染
    3. 按說明書要求正確判讀結(jié)果,30分名鐘后檢測結(jié)果可能不準(zhǔn)確

    呈色檢測線比對照線明顯深黑

    強(qiáng)陽性結(jié)果

    正常情況,不影響檢測結(jié)果

    檢測線或?qū)φ障囵^線附近出現(xiàn)白斑或白色條帶

    個別情況,NC膜自身質(zhì)量原因,生產(chǎn)無法控制

    該情況一般不影響檢測結(jié)果

    同一樣本血清檢出時間快于全血標(biāo)本

    相同體積的血清標(biāo)本含受檢物的量要高于全血標(biāo)本

    正常情況,不影響檢測結(jié)果

    NC膜表面顏色較深(紫紅甚至偏紫)

    測試剛開始該現(xiàn)象明顯,3-5分鐘后顏色就會明顯褪去屬正?,F(xiàn)象

    正常情況,不影響檢測結(jié)果

     

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